山*醇含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC2525
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：
1、標(biāo)準(zhǔn)品：臨用前將標(biāo)準(zhǔn)品用1mL蒸餾水溶解，配制成濃度為10 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)液待用，2-8℃可保存2周。
產(chǎn)品說明：
山*醇廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，不僅是糖運(yùn)輸形式之一，而且與生物抗逆性和食物風(fēng)味密切相關(guān)。因此，在糖代謝、抗逆性和食品研究中經(jīng)常需要檢測山*醇含量變化。
山*醇在堿性溶液中與銅離子形成藍(lán)色絡(luò)合物，在655nm波長有特征吸收峰。
技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.0583 mg/mL
線性范圍：0.125-4 mg/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
稱取約0.1g樣本，加入1mL蒸餾水研磨成勻漿，置沸水浴中煮沸10分鐘（蓋緊，以防止水分散失），冷卻至室溫后，8000g，常溫離心10min，取上清液待測。
二、測定步驟

1. 分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至655nm，分光光度計用蒸餾水調(diào)零。

2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備：臨用前將10mg/mL標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水稀釋至4、2、1、0.5、0.25、0.125、0（空白管）mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液待測。

3. 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表。

備注：實驗中每個標(biāo)準(zhǔn)管需230µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1. 樣本測定（在1.5mL EP管中依次加入下列試劑）：

注意事項：
如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測定。計算公式中注意乘以稀釋倍數(shù)。
參考文獻(xiàn)：
Salvucci M E, Stecher D S, Henneberry T J. Heat shock proteins in whiteflies, an insect that accumulates sorbitol in response to heat stress[J]. Journal of Thermal Biology, 2000, 25(5): 363-371.
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