植物組織果糖（FT）含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號(hào)：BC2455
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：
試劑一：10mg 果糖。臨用前加1mL蒸餾水溶解，得到10mg/mL的果糖標(biāo)準(zhǔn)液，2-8℃保存兩周。
產(chǎn)品說明：
果糖是一種最為常見的己酮糖，是葡萄糖的同分異構(gòu)體，以游離狀態(tài)大量存在于水果的漿汁和蜂蜜中，能與葡萄糖結(jié)合生成蔗糖。果糖是最甜的單糖，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、保健品生產(chǎn)中。
在酸性條件下果糖與間*二酚反應(yīng)，生成有色物質(zhì)，在480nm下有特征吸收峰。


技術(shù)指標(biāo)：
低檢出限：0.065 mg/mL
線性范圍：0.5-35 mg/mL
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
稱取約0.05g樣本，常溫研碎；加入0.5mL提取液，適當(dāng)研磨后快速轉(zhuǎn)移到有蓋離心管中；置于80℃水浴鍋中10min（蓋緊，以防止水分散失），振蕩3~5次，冷卻至室溫后，4000g，常溫離心10min，取上清；加入少量（約2mg）試劑四，80℃脫色30min（蓋緊，以防止水分散失）；再加入0.5mL提取液，4000g，常溫離心10min，取上清液測定。
二、測定步驟
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至480nm，分光光度計(jì)用蒸餾水調(diào)零。
2、試劑一的稀釋：取200μL 10mg/mL果糖標(biāo)準(zhǔn)液，加入300μL蒸餾水，充分混勻，配制成4mg/mL標(biāo)準(zhǔn)液使用，現(xiàn)用現(xiàn)配。（實(shí)驗(yàn)中每管需要30μL，為減小實(shí)驗(yàn)誤差，故配制大體積。）

3、樣本測定（在1.5mL EP管中依次加入下列試劑）：

渦旋混勻，置于80℃水浴鍋中準(zhǔn)確反應(yīng)10min（蓋緊，以防止水分散失），冷卻至室溫后取200μL至微量玻璃比色皿或96孔板中測定480nm處光吸收值，記為A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A測定管，并計(jì)算ΔA測定=A測定管-A空白管、ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需測1-2次。

注意事項(xiàng)：
如果樣本吸光值大于1.1，建議將樣本用提取液稀釋后進(jìn)行測定。計(jì)算公式中注意乘以稀釋倍數(shù)。
參考文獻(xiàn)：
[1] Varandas S, Teixeira M J, Marques J C, et al. Glucose and fructose levels on grape skin: interference in Lobesia botrana behaviour[J]. Analytica chimica acta, 2004, 513(1): 351-355.
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC0340/BC0345 糖原含量檢測試劑盒
BC2540/BC2545 纖維素酶（CL）活性檢測試劑盒
BC0330/BC0335 海藻糖含量檢測試劑

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