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Elisa檢測(cè)試劑盒檢測(cè)的目標(biāo)是抗原還是抗體?

更新時(shí)間:2020-12-14點(diǎn)擊次數(shù):3535
  Elisa檢測(cè)試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被豬藍(lán)耳病抗體(PRRS-Ab)捕獲抗原的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。
  
  在應(yīng)用Elisa檢測(cè)試劑盒時(shí),首先要清楚下面內(nèi)容:我們測(cè)定Elisa試劑盒到底是檢測(cè)抗體還是抗原?對(duì)這兩種抗體,抗原分別作了測(cè)試,大家可以根據(jù)我們給出的結(jié)果做個(gè)對(duì)別,從而分辨出Elisa試劑盒到底是檢測(cè)抗體還是抗原?
  
  1、檢測(cè)抗原:
  
  常用于檢測(cè)抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法,其次是競爭法。但競爭法在具體實(shí)驗(yàn)中有些困難,特別是檢測(cè)微生物的抗原,因?yàn)樾枰獦?biāo)記抗原,這對(duì)于某些抗原是很難做到的,甚至是不可能的。另外在競爭法中,酶標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起,許多標(biāo)本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì),可影響ELISA的結(jié)果。
  
  2、檢測(cè)抗體:
  
  檢測(cè)抗體種類常用的方法是檢測(cè)抗體種類的捕獲法,這個(gè)方法常用于檢測(cè)特異性IgG、IgA和IgM。這個(gè)方法是捕獲所需要檢測(cè)的一個(gè)種類的抗體,接下來是檢測(cè)捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體。間接ELISA在檢測(cè)IgG時(shí)比較簡單,但不適用于檢測(cè)其他種類的抗體,因?yàn)檠逯腥绻刑禺怚gG存在將與IgM或IgA等競爭結(jié)合抗原。
  
  Elisa檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng):
  
  1、試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。
  
  2、實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
  
  3、預(yù)處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。
  
  4、所有液體組分使用前充分搖勻。
  
  5、Elisa檢測(cè)試劑盒需要嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
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